梅里埃GP鑒定卡在微生物實驗室成功地進行細菌菌種保存,對于系統(tǒng)地分析流行菌株的生物學、分子生物學特征和耐藥性的變遷,以及對醫(yī)院感染病原學調查、新藥臨床研究都十分重要。
把3種梅里埃GP鑒定卡直接從-20°C移至35°C,待小孔液體*融化后,以無菌手續(xù),用注射器抽吸出陽性生長孔內的液體,點種于血平板或沙保弱平板,置35°C孵箱內24~48h復蘇。復蘇菌落經分離培養(yǎng)后,用VITEK系統(tǒng)對菌株進行鑒定和藥敏試驗,以金黃色葡萄球菌ATCC25923、大腸埃希菌ATCC25922、綠膿假單胞菌ATCC27853作質控。
菌株復活率:258株細菌按初始鑒定的結果,以伯杰細菌分類為依據,歸納為葡萄球菌屬、鏈球菌屬、腸桿菌科、腸球菌屬、假單胞菌屬、黃桿菌屬、不動桿菌屬、念珠菌屬8大類。各類菌屬的細菌100%的存活時間:葡萄球菌屬、腸桿菌屬、念珠菌屬為29個月,腸球菌屬、黃桿菌屬、不動桿菌屬為21個月,鏈球菌屬和假單胞菌屬.為10個月。
生物學特性及耐藥譜變化:258株細菌中共218株復活成功,復活菌株的培養(yǎng)特點、形態(tài)特征、生化特性均與初始鑒定結果一致,細菌的凍融復活前后藥敏譜也基本一致,符合率為93.7%~100%。
反復凍融的影響:從復活的各類菌株中選取30株的生化卡反復凍融5次,每次冰凍的時間保持24h以上。結果30株細菌5次反復凍融5次,每次冰凍的時間保持24h以上。結果30株細菌5次凍融均復活成功,且其生物學特性及耐藥譜未發(fā)生明顯的變化,證實凍融均復活成功,且其生物學特性及耐藥譜未發(fā)生明顯的變化,證實多次凍融對細菌的保存無影響。
與半固體菌種保存法的比較:用梅里埃GP鑒定卡和半固體菌種培養(yǎng)基同時保存12株臨床分離菌及3株ATCC25922、ATCC25923、ATCC27853基同時保存12株臨床分離菌及3株ATCC25922、ATCC25923、ATCC27853標準菌株6個月對照,其中半固體中的菌株定時轉種傳代。結果兩種標準菌株6個月對照,其中半固體中的菌株定時轉種傳代。結果兩種方法保存菌株的生物學特性均一致。方法保存菌株的生物學特性均一致.